Эндоспоры и другие покоящиеся формы прокариот. Метод окраски эндоспор по Пешкову

Эндоспоры(у неб группы бактерий)

-эндоспоры об-ся как стадия покоя в ж ц к-ки, связанная обычно с действием неблагопр факторов среды.

-спорообразование хар-но более чем для 15 родов бактерий, наиболее полно изучен у палочковидн бактерий аэробного рода Bacillus и анаэробного рода Clostridium.

Образование эндоспор:

1)подготовительный. Происходит в вегетативной кл-ке, на этом этапе прекр ростов процессы, прекр репликация ДНК, изм метаболизм, в кл стенке обр-ся дипиколиновая к-та(обесп термоуст) и обр-ся соли кальция.

2)обр-е споры. Цитопл мембр вегетат кл-ки обр-ет инвагинацию(впячивание) от перефирии к центу и отд спорогенную зону от ост соого кл-ки, а затем полностью обрастает эту зону, завершая обр-е проспорой.

Проспора распол внутри мат кл-ки и отграничена от неё 2-мя мембр слоями(внешним и внутренним) м\у двумя мембр слоями ф-ся зачаточный муреиновый слой, который станет оболочкой проростка споры.

Снаружи от оболочки ф-ся мощный кортекс:плотный, муреиновый слой. Проспора превращается в спору.

3)созревание – когда спора приобр хар-ную форму и преобр опр место в клетке.

Типы пасположения :

1)базиполярный – спора в центре

2)кластридиальный – спора смещена к оному полюсу клетки

3)плектридиальный – спора расположена полярно.

Форма спор обычно: округлая. овальная

Покровы спор: в основном белок, неболш кол-во углев и липидов.

У бол споры в экзоспоридах(мешочек)

В благопр усл проростает

Подогрев спор увеличивает верочтность прорастания

У эукариот српора – способ размножения, у прокариот – спора переживание неблагоприятных усл.

Экзоспоры – обр-ся только у метаболизирующих метан бактерий, на поверхности.

Цисты – возникают при истощении питат ресурсов, не уст-вы к действию выс температур

Акинеты – обр-ся у цианобактерий. Толстая оболочка, много пит вещ-в и пигментовэ

Гетероцисты обеспечивают фиксацию мол азота. Конечная дифф нитчатых цианобактерий.

Тип покоящихся клеток Повреждающий фактор
высокая температура высушивание
Миксоспоры миксобактерий гибель 90% после выдерживания при 50° в течение 20 мин гибель 50% после хранения в течение 6 сут
Цисты азотобактера 100%-я гибель после выдерживания при 60° в течение 15 мин 100%-я жизнеспособность при хранении в течение 12 сут
Акинеты цианобактерий гибель 95% после выдерживания при 40° в течение 10 мин 95%-я жизнеспособность после хранения в течение 15 мес при 4°
Эндоспоры некоторых эубактерий гибель 90% после выдерживания при 100° в течение 11 мин жизнеспособность сохранялась в течение приблизительно 1000 лет
Эндоспоры актиномицетов гибель 99% после выдерживания при 75° в течение 70 мин жизнеспособность сохранялась в течение 14 лет



Метод окраски эндоспор по Пешкову.

-мазки фиксируют жаром

-на мазок наливают раствор метилового синего и подогревают препарат над пламенем горелки, доводя до кипения. Кипятят 15-20 сек., по мере испарения добавляют новые порции красителя

- препарат тщательно промывают водой, при этом цитоплазма обесцвечивается, а спора удерживает краситель

- цитоплазму контрастно докрашивают в течение 30 сек. С 0,5% раствором нейтрального красного.

- препарат промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют с объективом 90Х. в поле зрения микроскопа будут видны розовые вегетативные клетки, содержащие эндоспоры, окрашенные в разные оттенки синего цвета в зависимости от возраста эндоспоры: темно-синие – молодые споры, голубые – сформировавшиеся.

13. Сходства и различия в строении клеток эукариот и прокариот.Размеры: (э) до 40 мкм в диаметре.объем в 1-10 тыс раз больше; (п) от 0,5 до 5 мкм в диаметре;искл до 500 мкм.

Форма организации(э)одноклеточные,многокл,нитчатые;(п) бол однокл,м.б нитч

Жгутики (э)сложные с распол трубочек 9+2, диаметр до 200нм; (п) простые, микротрубочки отсутствуют, до 20нм.

Организация генетич материала (э) оформленное ядро,хромосомы линейные, более одной,есть митоз; (п) нуклеоид не ограничен от цитоплазмы мембранами.одна кольцевая хромосома, нет митоза.

Локализация ДНК в цитоплазме: (э) в органеллах(митохондрии,хлоропласты); (п) плазмиды.



Движение цитоплазмы(э) есть;(п) нет.

Рибосомы (э)в цитоплазме 80S, в органелах 70S. (п) в цитоплазме 70S.

Дыхательная система:(э) митохондрии;(п) лизосомы и сама цитоплазматическая мембрана лизосомы.

Кл стенка:(э) прочная, целлюлоза,хитин; (п) прочная, муриин.

Фотосинтез:(э) в хлоропластах;(п) в мембранах.

Фиксация молекулярного азота:(э)не способны;(п)некоторые обладают.

Органеллы цитоплазмы:(э) много.есть окр-е 2-ой мембраной, (п) мало,без 2-ных мембран.


0007844899844596.html
0007886576211913.html
    PR.RU™